新型鸭呼肠孤病毒RT-LAMP检测方法的建立

作     者：于可响 马秀丽 韩宏宇 刘存霞 李玉峰 黄兵 宋敏训 Yu Kexiang;Ma Xiuli;Han Hongyu;Liu Cunxia;Li Yufeng;Huang Bing;Song Minxun

作者机构：山东省农业科学院家禽研究所山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室济南250023 山东农业大学动物科技学院泰安271018 

基　　金：山东省海外高层次人才(泰山学者)引进计划 山东省现代农业产业技术体系家禽创新团队计划(SDAIT-13-011-01) 公益性行业(农业)科研专项(201003012) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2015年第31卷第8期

页      码：71-75页

摘      要：建立适于基层实验室快速检测新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)的一步反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法。基于新型鸭呼肠孤病毒S3基因的6个保守区域设计了4条LAMP引物,利用Bst DNA聚合酶在63℃恒温保持45 min即可完成反转录和扩增反应,由此建立了RT-LAMP检测方法。该方法具有良好的特异性,除NDRV外对其他6种常见鸭病的检测结果均为阴性。该方法对病毒RNA的最低检出量为0.1 pg,是常规RT-PCR方法的100倍。临床应用结果表明,该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为98%,而且对仪器的要求低,适于基层实验室和现场检测。

主 题 词：新型鸭呼肠孤病毒 S3基因 一步反转录环介导等温扩增 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.08.011

馆 藏 号：203397606...