禽偏肺病毒通用型EvaGreen荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者：王贝贝 吴艳阳 高冬生 刘延珂 万文妍 杨宁霞 王新卫 赵军 WANG Bei-bei;WU Yan-yang;GAO Dong-sheng;LIU Yan-ke;WAN Wen-yan;YANG Ning-xia;WANG Xin-wei;ZHAO Jun

作者机构：河南农业大学禽病研究所河南郑州450002 

基　　金：国家重点研发计划(2016YFD0501100) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第40卷第10期

页      码：908-912页

摘      要：为建立各亚型禽偏肺病毒(aMPV)的快速检测方法,本研究对aMPV 4个亚型的核苷酸序列比对分析,针对aMPV N基因的保守区域设计了一对特异性引物,通过条件优化,建立了检测aMPV各亚型的通用型EvaGreen荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法在模板为10~3拷贝/μL～10~8拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;检测下限为10~3拷贝/μL,敏感性为常规RT-PCR的10倍。与其它常见禽类病毒无交叉反应;组内重复试验和组间重复试验的变异系数分别为0.89%～1.34%和2.01%～3.29%,具有较好的重复性。利用所建立的方法对河南省部分地区鸡场送检病鸡样品进行检测,结果显示被检地区鸡场的aMPV的平均阳性率为46.66%,与普通RT-PCR的符合率为100%。本研究建立的EvaGreen荧光定量RT-PCR方法可以用于aMPV的检测,为aMPV感染的流行病学调查提供了可行方法。

主 题 词：禽偏肺病毒 通用型 EvaGreen RT-PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.201802014

馆 藏 号：203401965...