H5、H9亚型禽流感病毒及鸭坦布苏病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：李海琴 傅光华 黄瑜 韦启鹏 唐维国 LI Hai-qin;FU Guang-hua;HUANG Yu;WEI Qi-peng;TANG Wei-guo

作者机构：江西省农业科学院畜牧兽医研究所江西南昌330200 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 

基　　金：国家水禽产业技术体系建设专项(CARS-43-33) 江西省对外科技合作计划项目(20144BDH80014) 

出 版 物：《福建农业学报》 (Fujian Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2015年第30卷第8期

页      码：727-730页

摘      要：为建立一种能同时快速检测H5、H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)和鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)的多重PCR检测方法,根据GenBank发表的H5、H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因和DTMUV的NS5基因序列,分别设计了3对特异性引物,通过优化扩增条件,建立了同时检测H5亚型AIV、H9亚型AIV和DTMUV的多重PCR检测方法,对其特异性及敏感性进行检验,并在临床中进行初步应用。结果表明,该多重PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可同时扩增出大小分别为732bp(H9亚型AIV)、380bp(H5亚型AIV)、250bp(DTMUV)的特异片段,利用本试验建立的多重PCR对其他鸭病病原体进行扩增结果均为阴性,利用这3对引物对H5、H9亚型AIV和DTMUV进行敏感性检测,结果显示最低检测极限分别为533pg·μL-1、56pg·μL-1和6.6ng·μL-1。对临床200份样品的检测结果表明该多重PCR检测方法具有快速、敏感、特异性强等优点,适用于临床检测应用。

主 题 词：H5亚型禽流感病毒 H9亚型禽流感病毒 鸭坦布苏病毒 多重PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0384.2015.08.001

馆 藏 号：203402067...