高致病性猪蓝耳病病毒GST-Nsp2融合蛋白的原核表达

作     者：刘金玲 魏澍 潘树德 LIU Jin-ling;WEI Shu;PAN Shu-de

作者机构：沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110866 辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁沈阳110164 

基　　金：国家科技攻关项目(413010209) 沈阳农业大学校青年基金项目(200705) 

出 版 物：《江西农业大学学报》 (Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis)

年 卷 期：2012年第34卷第3期

页      码：546-549页

摘      要：通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV)Nsp2基因进行克隆表达以获得蛋白,为该病的诊断预防奠定基础。采用自行设计的引物对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒进行RT-PCR扩增,将产物基因回收纯化测序后构建PGEX-6P-1-Nsp2原核表达载体,用BL21(DE3)细胞进行转化,挑选阳性菌,用IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE电泳和Western-Blot对表达产物进行鉴定。获得了HPPRRSV Nsp2基因序列,成功构建了PGEX-6P-1-Nsp2原核表达载体,经37℃,4 h获得表达产物,将表达产物进行SDS-PAGE和Western-Blot分析,获得了一条约42 ku浓缩蛋白带。本实验的克隆表达产物为高致病性蓝耳病病毒Nsp2目的蛋白。

主 题 词：高致病性 猪繁殖与呼吸综合征病毒 Nsp2基因 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2286.2012.03.025

馆 藏 号：203402759...