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小反刍兽疫病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

小反刍兽疫病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者:付明哲 杨峰 郝玉青 许信刚 张琪 FU Ming-zhe;YANG Feng;HAO Yu-qing;XU Xin-gang;ZHANG Qi

作者机构:西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 榆林市动物疫病预防控制中心陕西榆林719000 

基  金:陕西省重点研发计划项目(2018ZDXM-NY-039) 杨凌示范区农业科技示范推广项目(TS-2016-13 2017-TS-23) 西北农林科技大学试验示范站(基地)科技成果推广项目(TGZX2017-43) 

出 版 物:《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期:2018年第39卷第11期

页      码:14-18页

摘      要:为建立一种特异、灵敏、量化且耗时短的小反刍兽疫病毒(PPRV)检测方法,通过设计一对PPRV N基因的引物,建立检测PPRV的Eva Green实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)的检测方法,对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行分析,并用建立的方法对临床疑似PPRV样品进行检测。结果显示,所建立的检测PPRV RT-qPCR方法标准曲线具有良好的线性关系(R2=0.999);与羊口疮病毒(ORFV)、山羊痘病毒(GTPV)、羊流产嗜性衣原体(Goat Chlamydophila abortus)无交叉反应,特异性强;相比常规RTPCR检测方法灵敏度高出100倍;重复试验变异系数系数在1%以下,重复性良好。对16份临床样品提取的RNA检测结果显示,该方法与常规RT-PCR检测结果一致。建立的RT-qPCR检测方法可用于临床PPRV的检测。

主 题 词:小反刍兽疫病毒 实时荧光定量PCR 检测 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.16437/j.cnki.1007-5038.2018.11.002

馆 藏 号:203403659...

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