对虾白斑综合征病毒LAMP检测方法的建立

作     者：冯华 张改平 郭军庆 王爱萍 赵丽娜 杜晓明 王林林 

作者机构：郑州大学生物工程系河南郑州450001 河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室河南郑州450002 河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003 

基　　金：国家海洋局第三研究所合作研究项目(nycytx-46) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2011年第41卷第7期

页      码：707-711页

摘      要：根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28的基因序列设计合成4条特异性引物,以pMDT-VP28重组质粒为标准模板,通过优化反应体系和反应条件,建立了WSSV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定LAMP对WSSV-DNA的最低检测限,并与巢式PCR进行了比较。结果显示,该LAMP方法的最佳反应温度为65℃,反应时间为60min;LAMP对WSSV的最低检测限为10copies/μL,而巢式PCR为100copies/μL,表明该LAMP方法的敏感性显著高于巢式PCR检测方法。因此,WSSV的LAMP检测方法比PCR更为简便、快速、灵敏,且无需昂贵的变温仪器,更适应水产养殖的现地检测,本研究为WSSV早期感染的快速检测提供了新方法。

主 题 词：对虾白斑综合征病毒 环介导等温扩增 巢式聚合酶链反应 VP28基因 

学科分类：08[工学] 0906[农学-水产类] 09[农学] 0822[工学-核工程类] 

核心收录：

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2011.07.020

馆 藏 号：203404470...