猪巨细胞病毒gB蛋白抗原表位富集区的表达和抗原性的分析
作者机构：湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128
基 金：湖南省科技重大专项(2007FJ1003) 湖南省农业大学人才引进基金(04YJ103)
出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)
年 卷 期：2010年第32卷第2期
页 码：126-130页
摘 要：为表达猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因,本研究根据GenBank登录的PCMV gB基因序列设计1对引物,以感染PCMV猪肺细胞总DNA为模板,采用PCR扩增得到gB基因片段,克隆于pMD-18T并进行核苷酸序列测定。利用DNAStar分析gB蛋白的抗原表位,选择抗原表位富集的2个基因片段(命名为PCMVgB1和PCMVgB2)分别克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒并转化Rosetta(DE3)宿主菌。结果显示:扩增的gB基因与GenBank登录的PCMV gB基因的核苷酸同源性在97.6%～98.9%之间,推导的氨基酸同源性在97%～98.6%之间。经IPTG诱导的含pET-gB1和pET-gB2重组质粒的宿主菌可表达重组gB1和gB2蛋白,SDS-PAGE显示分子量约为62ku和36ku。Western blot和间接ELISA结果表明,重组gB1和gB2蛋白均具有反应原性。
主 题 词：猪巨细胞病毒 gB基因 原核表达 间接ELISA
学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102]
核心收录：
馆 藏 号：203404486...
