牛病毒性腹泻病毒E1蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

作     者：康彪 高闪电 独军政 田占成 殷宏 胡永浩 KANG Biao;GAO Shan-dian;DU Jun-zheng;TIAN Zhan-cheng;YIN Hong;HU Yong-hao

作者机构：甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 

基　　金：牛重要病毒病多价多联疫苗及防控技术研究(2017YFD0500904) 农业科技创新工程(2014ZL010) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第39卷第11期

页      码：30-34页

摘      要：利用原核表达系统表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的E1蛋白,以制备抗E1多克隆抗体。根据E1蛋白的编码序列,设计一对特异性引物,利用PCR扩增BVDV E1片段,定向插入pPROEX-HTb载体中,转化大肠埃希菌BL21感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导表达、金属离子层析法纯化获得分子质量为23ku的重组E1蛋白。利用纯化的E1重组蛋白经3次免疫新西兰白兔后收获多克隆抗体,间接ELISA检测多克隆抗体效价达到1∶12 800以上。间接免疫荧光试验证实多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的反应性和特异性。成功制备了BVDV重组E1蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测和E1蛋白功能的研究奠定了基础。

主 题 词：牛病毒性腹泻病毒 E1蛋白 表达 多克隆抗体 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16437/j.cnki.1007-5038.2018.11.005

馆 藏 号：203406594...