寻找一种诊治心肌损伤的新方法:鼠抗人cTnI单抗Fab段基因克隆和序列分析(英文)

作     者：李妍妍 杨笛 刘剑南 卞智萍 徐晋丹 陈相健 顾春荣 张寄南 LI Yan-yan;Yang Di;Liu Jian-nan;Bian Zhi-ping;XU Jin-dan;Chen Xiang-jian;Gu Chun-rang;ZHANG Ji-nan

作者机构：南京医科大学第一附属医院心血管病研究所江苏省南京市210029 

基　　金：江苏省135临床生物学诊断与治疗重点实验室和江苏省人类功能基因组重点实验室基金资助(SKZ200205)~~ 

出 版 物：《中国临床康复》 (Chinese Journal of Clinical Rehabilitation)

年 卷 期：2005年第9卷第19期

页      码：213-215,i004页

摘      要：背景:为将鼠抗人cTnI单克隆抗体应用人体进行体内诊断或作为治疗心肌损伤的药物载体,必须降低鼠源性抗体的免疫源性,克服其人抗鼠抗体反应,需要对其进行人源化改造。目的:克隆鼠抗人cTnI单克隆抗体Fab段基因并进行序列分析。设计:单一样本研究。单位:一所医科大学附属医院的心血管病研究所。材料:本实验于2003-01/2004-05在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所完成。分泌鼠抗人cTnI单克隆抗体的杂交瘤细胞株(JS200202)由南京医科大学第一附属医院心血管病研究所提供。方法:设计扩增鼠IgG重链Fd段及κ轻链引物,从分泌cTnI单抗的杂交瘤细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增,对扩增产物进行分子克隆、测序及序列分析。主要观察指标:重链Fd段和κ轻链基因序列及其所属亚型。结果:重链和轻链引物分别扩增出一约700bp和800bpDNA片段。经序列分析,与已发表的鼠IgG基因序列对比,其核苷酸及其所推导的氨基酸序列符合鼠IgG1Fab段特征。在GenBank登录,登录号为AY484430(重链),AY484431(轻链);氨基酸序列登录号为AAR83243(重链),AAR83244(轻链)。结论:本实验室获得了完整的鼠源性抗人cTnI单克隆抗体Fab段基因,为鼠抗人cTnI单克隆抗体的人源化改造奠定了基础。

主 题 词：抗体,单克隆 基因 序列分析 聚合酶链反应 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-8225.2005.19.052

馆 藏 号：203408760...