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BALB/c小鼠金属硫蛋白-1 cDNA基因在乳酸菌质粒表达载体pNZ2103上的克隆

BALB/c小鼠金属硫蛋白-1 cDNA基因在乳酸菌质粒表达载体pNZ2103上的克隆

作     者:林琳 任风 赵宝昌 LIN Lin;REN Feng;ZHAO Bao-chang

作者机构:大连医科大学生化教研室辽宁大连116027 

基  金:辽宁省教委资助(990221059) 

出 版 物:《中国微生态学杂志》 (Chinese Journal of Microecology)

年 卷 期:2006年第18卷第1期

页      码:29-31页

摘      要:目的用乳酸菌质粒表达载体pNZ2103克隆BALB/c小鼠金属硫蛋白(MT)-1 cDNA基因。方法设计一对含有限制酶Pst1和H indⅢ位点的引物。以质粒pET21 a-MT为模板,采用PCR法扩增BALB/c小鼠MT-1cDNA。用限制性内切酶Pst1和H indⅢ将MT-1 cDNA克隆于质粒pNZ2103形成重组质粒pNZ2103-MT。将pN2103-MT转化进入大肠埃希菌DH5α。采用PCR法和Pst1、H indⅢ双酶切方法鉴定含有pNZ2103-MT的转化子。12%SDS-PAGE鉴定pNZ2103-MT在大肠埃希菌DH5α的表达水平。结果获得含有pNZ2103-MT的DH5α转化子。结论以乳酸菌质粒表达载体pNZ2103构建的pNZ2103-MT在大肠埃希菌中表达水平较低,采用SDS-PAGE难以检测到表达水平的金属硫蛋白。

主 题 词:BALB/c小鼠 金属硫蛋白 乳酸菌质粒表达载体pNZ2103 克隆 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1005-376X.2006.01.012

馆 藏 号:203409004...

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