沉默抑制子CMV 2b基因的克隆及其反向重复植物表达载体的构建

作     者：宋培培 李爽 檀根甲 贾琳 丁菲 江彤 SONG Pei-pei;LI Shuang;TAN Gen-jia;JIA Lin;DING Fei;JIANG Tong

作者机构：安徽农业大学植物保护学院安徽合肥230036 

基　　金：安徽省自然科学基金项目(070411002) 安徽省教育厅自然科学基金重点项目(KJ2008A133) 

出 版 物：《激光生物学报》 (Acta Laser Biology Sinica)

年 卷 期：2010年第19卷第3期

页      码：347-352页

摘      要：从安徽亳州采集表现明显CMV症状的烟草样本,取ELISA检测阳性反应最强的样本提取总RNA。设计特异性引物扩增CMV RNA2部分片段,克隆并测序。其中包含的2b基因全长336个核苷酸,编码111个氨基酸。将来源于安徽烟草的CMV 2b基因与其它CMV 2b基因进行序列比对,结果表明,来源于安徽烟草的CMV2b基因与来源于韩国的2b基因AF033667的核苷酸序列相似性最高,达98.8%。构建2b基因系统关系树,也表明来源于安徽烟草的CMV 2b基因与AF033667亲缘关系最近。以安徽CMV 2b为模板,分别扩增大小约为300 bp的正向片段CMV 2b(r)和反向片段CMV 2b(i)。先后将反向片段CMV 2b(i)和正向片段CMV 2b(r)分别插入载体pSK-In所含intron两侧,获得重组质粒pSK-2b(r)-In-2b(i)。再将含intron的正反向片段插入pBIN438,最终得到含CMV 2b部分序列反向重复的植物表达载体pBIN-2b(r)-In-2b(i)。

主 题 词：CMV 2b基因 沉默抑制子 反向重复表达载体 构建 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-7146.2010.03.011

馆 藏 号：203410576...