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一种快速、特异性检测小麦中链格孢菌(Alternaria alternata)的巢式PCR方法

一种快速、特异性检测小麦中链格孢菌(Alternaria alternata)的巢式PCR方法

作     者:秦召 李巧云 段宗彪 姜玉梅 牛吉山 QIN Zhao;LI Qiao-yun;DUAN Zong-biao;JIANG Yu-mei;NIU Ji-shan

作者机构:河南农业大学国家小麦工程技术研究中心河南郑州450002 河南农业大学生命科学学院河南郑州450002 

基  金:863计划项目(2012AA101105) 河南省重大科技攻关项目(122101110200) 

出 版 物:《河南农业科学》 (Journal of Henan Agricultural Sciences)

年 卷 期:2014年第43卷第10期

页      码:67-73页

摘      要:为建立检测小麦中链格孢菌(Alternaria alternata )的方法,从河南省小麦黑胚籽粒上分离得到7个优势 *** 病原菌株,对其 rDNA 的内部转录间隔区序列(ITS)进行测序,序列比较表明,分离到的病原菌株与 GenBank 公布的 *** 的 ITS 区序列一致性达到99%~100%。根据 Alternaria 属菌株(***、***、***)和麦类根腐离蠕孢菌(Bipolaris sorokiniana )的 ITS 序列比对结果,设计出1对 *** 特异性引物 Aa1F/Aa1R。利用多种河南省小麦的主要病原真菌对该引物的特异性进行验证,只有在 *** 中能特异性地扩增出1条443 bp 的 DNA 片段。以真菌通用引物 ITS1/ITS4为外侧引物、特异性引物Aa1F/Aa1R 为内侧引物进行巢式 PCR 扩增,能检测到 *** DNA 的最低质量浓度为50 pg/μL。因此,建立的巢式 PCR 方法能够快速、特异地检测小麦中的 ***。

主 题 词:小麦 链格孢菌 检测 巢式 PCR 

学科分类:09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D O I:10.3969/j.issn.1004-3268.2014.10.016

馆 藏 号:203412723...

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