探针实时荧光定量PCR检测白藜芦醇体外抗鸭瘟病毒活性方法的建立及应用

作     者：徐娇 胡志强 殷中琼 程安春 贾仁勇 李丹丹 XU Jiao;HU Zhi-qiang;YIN Zhong-qiong;CHENG An-chun;JIA Ren-yong;LI Dan-dan

作者机构：四川农业大学动物医学学院四川雅安625014 四川农业大学预防兽医研究所四川成都611130 

基　　金：国家"十二五"农村领域国家科技计划资助项目(2011BAD34B03-4) 四川省青年科技创新研究团队基金资助项目(2013TD0015) 四川农业大学优秀博士学位论文培育基金资助项目(YB201304) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2014年第34卷第11期

页      码：1738-1742页

摘      要：建立以TaqMan荧光探针为特点的PCR,检测白藜芦醇体外抗鸭瘟病毒活性。本研究针对鸭瘟病毒UL30基因序列设计特异性引物和TaqMan荧光探针,建立鸭瘟病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并验证方法的特异度、敏感度和稳定性及对临床样品进行检测;运用该方法检测白藜芦醇对鸭胚成纤维细胞接种鸭瘟病毒后细胞中病毒增殖情况的影响,用以评价该药物体外抗鸭瘟病毒效果。结果显示,该方法建立的定量标准曲线阈值循环数(Threshold cycle,Ct)与模板拷贝数呈良好线性关系(R2=0.997),斜率为-3.328,扩增效率(E)为99.7%,具有良好的特异度、敏感度和稳定性并能对临床样本进行准确的检测。运用该方法检测白藜芦醇体外抗鸭瘟病毒结果显示:经白藜芦醇处理后,染毒细胞中病毒拷贝数为(7.71±0.37)×104,与病毒对照组比较(5.63±0.26)×106明显减少(P<0.01)。结果表明,TaqMan探针实时荧光定量PCR方法建立并成功用于体外药物抗鸭瘟病毒的检测;白藜芦醇具有良好的体外抗鸭瘟病毒活性。

主 题 词：鸭瘟病毒 实时荧光定量PCR 白藜芦醇 抗病毒活性 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2014.11.008

馆 藏 号：203412875...