PCV3河南株Cap基因的克隆、测序及其在大肠杆菌中的表达

作     者：郭奎 徐朋丽 赵宇 郑慧华 杨明凡 陈红英 GUO Kui1,2 ,XU Peng-li1 ,ZHAO Yu1 ,ZHENG Hui-hua1 ,YANG Ming-fan1,3 ,CHEN Hong-ying1,3

作者机构：河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150069 河南农业大学郑州市猪重大疫病防控重点实验室河南郑州450002 

基　　金：河南省产学研合作计划资助项目(152107000003) 河南省基础与前沿技术研究计划资助项目(142300410156) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2018年第38卷第11期

页      码：2063-2067页

摘      要：为研究猪圆环病毒3型（PCV3）Cap基因在大肠杆菌中的表达产物是否具有免疫原性,根据GenBank中发表的PCV3基因组序列,设计1对特异性引物,PCR扩增PCV3 Cap基因,克隆到pMD18-T载体。测序结果表明获得了Cap基因,其大小为543bp。并将Cap亚克隆到原核表达载体pET-28a中,再转化入大肠杆菌Rosetta（DE3）中,获得重组菌株。获得的重组菌37℃、0.6mmol/L IPTG诱导6h,进行SDS-PAGE及Western blot分析。重组菌破碎后从沉淀中获取1条约24 600的新蛋白带,可与小鼠抗His单克隆抗体发生特异性反应。有研究表明PCV3与PCV2不具有免疫交叉保护作用,因此本试验表达的具有良好的抗原性PCV3 Cap蛋白,为PCV3新型亚单位疫苗和ELISA诊断试剂盒的研制奠定了基础。

主 题 词：猪圆环病毒3型 克隆 Cap蛋白 表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.11.06

馆 藏 号：203414906...