猪PEDV与PDC_OV二重RT-PCR检测方法的建立

作     者：孔维欢 王晶晶 万鹏程 石国庆 KONG Wei-huan;Wang Jing-jing;WAN Peng-cheng;SHI Guo-qing

作者机构：石河子大学动物科技学院石河子832000 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所石河子832000 

基　　金：国家重点研发计划项目(2017YFD0501904 2017-2020) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2018年第34卷第11期

页      码：205-209页

摘      要：旨在建立能同时检测出猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪丁型冠状病毒(Porcine delta corona virus,PDCOV)的二重RT-PCR检测方法。根据GenBank已收录发表的PEDV和PDCOV基因序列设计2对特异性引物,首先运用RT-PCR反应技术,通过PEDV和PDCOV病毒的目的基因的单项扩增,对反应条件进行优化。然后通过特异性试验、敏感性试验以及临床样品的检测验证确定二重RT-PCR方法的建立。结果显示,目的基因PEDV-M扩增的片段大小是750 bp,PDCOV-N扩增的片段大小是372 bp;能够同时检测出PEDV和PDCOV目的基因,却检测不到PRV、CSFV、PPV三种病毒;体系优化扩增PEDV-PDCOV混合核酸浓度下限为100 pg/μL;能够初步诊断出临床疑似病毒感染的病例。结果表明,成功的建立PEDVPDCOV二重RT-PCR检测方法,此方法敏感性高、特异性强,是一种能够快速有效的检测出猪PEDV-PDCOV单病毒感染或多病毒混合感染的临床诊断方法。

主 题 词：PEDV PDCOV RT-PCR 临床诊断 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13560/J.CNKI.BIOTECH.BULL.1985.2018-0365

馆 藏 号：203416545...