RNAi对波动性葡萄糖诱导的人脐静脉内皮细胞糖原合成酶激酶-3β、β-联蛋白作用的研究

作     者：梁继兴 李连涛 陈彦 游婷婷 陈玉芳 沈小燕 林丽香 LIANG Ji-xing;LI Lian-tao;CHEN Yan;YOU Ting-ting;CHEN Yu-fang;SHEN Xiao-yan;LIN Li-xiang

作者机构：福建省立医院内分泌科福州350001 福建医科大学省立临床医学院福州350001 

基　　金：福建省自然科学基金资助项目(2014J01402) 

出 版 物：《创伤与急诊电子杂志》 (Journal of Trauma and Emergency(Electronic Version))

年 卷 期：2018年第6卷第2期

页      码：73-76页

摘      要：目的构建糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)特异的RNAi腺病毒表达载体,感染原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC),观察其对波动性浓度葡萄糖溶液诱导的HUVEC Wnt信号通路中GSK-3β、β-联蛋白(β-catenin)的影响。方法设计合成针对GSK-3βmRNA不同位点的短发荚RNA(short hairpin RNA,shRNA)编码序列,重组RNAi腺病毒表达载体。实验分为3组,空白对照组、阴性对照组、实验组。空白对照组使用波动性浓度葡萄糖溶液(5.5 mmol/L和30.5 mmol/L两种浓度的葡萄糖溶液每日交替培养,模拟血液中葡萄糖浓度的波动)培养HUVEC;阴性对照组使用波动性浓度葡萄糖溶液培养HUVEC,并使用无携带GSK-3β基因的腺病毒感染培养的HUVEC;实验组使用波动性浓度葡萄糖溶液培养HUVEC,并GSK-3β特异的RNAi腺病毒感染培养的HUVEC。Western印迹法波动性浓度葡萄糖溶液干预前及干预后72小时3组的GSK-3β、β-联蛋白水平。结果波动性浓度葡萄糖溶液干预72小时后,实验组的GSK-3β表达水平(0.1068±0.0034)较空白对照组、阴性对照组低,差异有统计学意义(F=10886.388,P=0.000);实验组的β-联蛋白水平表达水平(0.6653±0.0167)较空白对照组、阴性对照组低,差异有统计学意义(F=315.96,P=0.000)。结论构建的RNAi腺病毒感染HUVEC后可以抑制高糖诱发的GSK-3β蛋白表达、增加细胞内β-联蛋白的蛋白水平。

主 题 词：RNA干扰 糖原合成酶激酶-3β β-联蛋白 脐静脉 内皮细胞 波动葡萄糖 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.16746/j.cnki.11-9332/r.2018.02.005

馆 藏 号：203416793...