重组真核表达质粒pHsp70-hsv-tk的构建及在细胞内的热诱导表达

作     者：唐秋莎 陈道桢 张东生 TANG Qiu-sha;CHEN Dao-zhen;ZHANG Dong-sheng

作者机构：东南大学基础医学院江苏南京210009 无锡市妇幼保健院中心实验室江苏无锡214002 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(批准号:30500601) 国家863计划资助项目(批准号:2007AA03Z356) 无锡市医院管理中心重大技术项目资助(批准号:ZD0604) 

出 版 物：《医学研究生学报》 (Journal of Medical Postgraduates)

年 卷 期：2008年第21卷第11期

页      码：1132-1137页

摘      要：目的:构建用于靶向基因治疗的重组真核表达质粒pHsp70-hsv-tk(pHT),体外转染SMMC-7721肝癌细胞,观察热诱导基因表达情况。方法:设计1对引物,以pHSV-106质粒为模板进行PCR扩增,将扩增产物纯化所得目的基因片段与pD3SX载体连接,转化大肠杆菌***5α,克隆PCR法筛选菌落,测序鉴定后大量抽提质粒。磁性转染法将pHT导入SMMC-7721,加热处理后,用RT-PCR法检测tk基因的整合。结果:获得重组的hsv-tk基因条带。结论:成功构建了pHT质粒,可用于进行靶向性基因治疗研究。

主 题 词：真核表达 pHsp70-hsv-tk 构建 热诱导表达 重组真核表达质粒 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-8199.2008.11.008

馆 藏 号：203418060...