犬瘟热病毒N蛋白基因的克隆、原核表达及其表达产物抗原性鉴定

作     者：申卫红 马素贞 陈胜男 刘腾飞 陶玉成 简子健 SHEN Wei-hong;MA Su-zhen;CHEN Sheng-nan;LIU Teng-fei;TAO Yu-cheng;JIAN Zi-jian

作者机构：新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 

基　　金：新疆维吾尔自治区高新技术项目(200611107) 

出 版 物：《新疆农业大学学报》 (Journal of Xinjiang Agricultural University)

年 卷 期：2010年第33卷第2期

页      码：137-141页

摘      要：参考GenBank中发表的CDVN蛋白基因序列，用Oligo6．0软件设计一对特异性引物，从患犬瘟热的犬全血样品中提取总RNA，经RT—PCR扩增得到1572bp的基因片段，将其插入pMD18-T克隆载体中构建了pMD18-CDVN重组质粒，将其转入到大肠杆菌DH5a中，进行鉴定、测序。将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-2连接构建了pGEX-4T-2-CDVN重组质粒，转化到大肠杆菌BL21（DE3）中，进行鉴定、测序、IPTG诱导表达。序列分析表明克隆的CDVN蛋白基因从起始密码子ATG开始到终止密码子TAA结束全长为1572个核苷酸，与GenBank中发表的CDVN蛋白基因序列相比同源率达到93．9％～99．1％。Western-blotting分析显示表达产物为84kDa的融合蛋白，可被犬瘟热抗血清所识别，具有良好的抗原性。

主 题 词：犬瘟热病毒 N蛋白基因 克隆 原核表达 抗原性 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-8614.2010.02.010

馆 藏 号：203419369...