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多重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母菌方法的建立与应用

多重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母菌方法的建立与应用

作     者:马保臣 秦卓明 蔡玉梅 董玉兰 柴同杰 MA Bao-chen;QIN Zhuo-ming;CAI Yu-mei;DONG Yu-lan;CHAI Tong-jie

作者机构:山东农业大学动物科技学院泰安271018 山东省农业科学院济南250000 中国农业大学动物医学院北京100094 

基  金:德国政府基金会(DAAD)国际优秀学者资助项目[423-china Mongolei](2004.06-2006.05) 

出 版 物:《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期:2006年第37卷第11期

页      码:1202-1208页

摘      要:参照GenBank发表的序列,在金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和停乳链球菌16S rRNA与23S rRNA之间的区域设计了3对引物,参照念珠菌和隐球菌的18S rRNA的序列设计1对引物,建立了检测金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌4种乳腺炎主要致病菌的多重PCR方法。参照Skladny的方法制备模拟了细菌感染临床标本。结果表明:本试验建立的多重PCR方法具有较好的特异性,多重PCR方法检测乳样中的金黄色葡萄球菌的细菌最小浓度为104CFU/mL,检测无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌的细菌最小浓度分别为102CFU/mL、103CFU/mL和103CFU/mL。通过对采自临床型乳腺炎(46个)和隐性乳腺炎(167个)动物共计213个乳样分别用传统细菌学培养法和多重PCR方法进行检测,多重PCR对金黄色葡萄球菌和酵母真菌的检测具有更高的检出率(P0.05)。

主 题 词:多重PCR 乳腺炎 金黄色葡萄球菌 无乳链球菌 停乳链球菌 酵母真菌 

学科分类:090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0366-6964.2006.11.020

馆 藏 号:203419411...

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