广西产拳卷地钱SCoT-PCR引物筛选及反应体系优化

作     者：朱华 谢凤凤 黎理 尚晓红 李鹏 李平凤 Zhu Hua;Xie Fengfeng;Li Li;Shang Xiaohong;Li Peng;Li Pingfeng

作者机构：广西中医药大学南宁530200 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室南宁530007 

基　　金：国家自然科学基金(No.81260620) 壮瑶药协同创新中心(桂教科研20号)、广西壮瑶药重点实验室(桂科基字32号)、广西重点学科壮药学(桂教科研16号)、八桂学者“中药创新理论与药效研究” 

出 版 物：《壮瑶药研究季刊》 (Research of Zhuang and Yao Ethnic Medicine)

年 卷 期：2017年第1期

页      码：114-122页

摘      要：目的：对影响广西产拳卷地钱SCoTPCR反应的各因素进行优化，建立稳定的反应体系。方法：采用改进的CTAB法提取拳卷地钱基因组DNA；以DNA浓度、Taq聚合酶、Mg2＋、dNTP、引物浓度的5个主要因素进行五因素四水平的正交设计，对拳卷地钱SCoTPCR反应体系进行优化。结果：DNA条带整齐，无RNA污染、无降解、无弥散的荧光出现、加样孔清晰。紫外检测结果，0D260／280在1．714-2．199之间，拳卷地钱最佳反应体系（50μL）为：DNA模板30ng、MG2＋2mmol／L、dNTP0．2mmol／L、引物0．4μmol／L、TaqDNA聚合酶0．5U。结论：建立并优化了拳卷地钱SCoTPCR反应体系，为拳卷地钱品种鉴定、遗传多样性评价及亲缘关系分析提供实验数据，为药材资源开发利用提供参考依据。

主 题 词：拳卷地钱 SCoT-PCR 引物筛选 体系优化 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100403[100403] 10[医学] 

馆 藏 号：203422225...