正交设计优化星星草ISSR-PCR反应体系研究

作     者：沙伟 滕兆岩 倪红伟 SHA Wei;TENG Zhao-yan;NI Hong-wei

作者机构：齐齐哈尔大学生命科学与工程学院黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江省科学院自然资源研究所黑龙江哈尔滨150000 

基　　金：省攻关重点项目(GB04B606) 黑龙江省自然科学基金重点项目(B类 ZJN0502) 国土资源部 财政部重大项目 黑龙江省科学院基金重大项目 

出 版 物：《中国草地学报》 (Chinese Journal of Grassland)

年 卷 期：2006年第28卷第6期

页      码：52-55,102页

摘      要：采用正交设计法优化适合于星星草的ISSR体系,对影响ISSR—PCR的多个因素,包括引物浓度、Taq酶的用量、Mg2+和dNTP浓度进行了比较、优化;同时又对DNA模板浓度,PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了筛选。结果确定了星星草ISSR—PCR反应体系的最佳方案为:PCR扩增程序,94℃预变性5min;进行40个循环的94℃变性45s,55℃复性45 s,72℃延伸2 min;72℃延伸10 min,4℃保存。20μl反应体系包括10%buffer 2μl、模板DNA60ng、dNTP 100μmol/L、TaqDNA聚合酶1.5U、引物0.8mmol/L、Mg2+2.0mmol/L。

主 题 词：星星草 ISSR 正交设计 PCR反应 体系优化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-5021.2006.06.011

馆 藏 号：203423306...