用微滴式数字PCR检测母体游离DNA中父源性β-地中海贫血CD41-42突变

作     者：张艺佳 龚小倩 何怡 黄丽婵 张强 刘彦慧 李九凤 陈亚军 周万军 Zhang Yijia;Gong Xiaoqian;He Yi;Huang Lichan;Zhang Qiang;Liu Yanhui;Li Jiufeng;Chen Yajun;Zhou Wanjun

作者机构：南方医科大学医学遗传学教研室广州510515 广东省韶关市妇幼保健院512026 广东省东莞市妇幼保健院523000 

基　　金：韶关市科技计划(2015CX/K19) 东莞市科技发展计划(2013108101019) 

出 版 物：《中华医学遗传学杂志》 (Chinese Journal of Medical Genetics)

年 卷 期：2018年第35卷第6期

页      码：787-790页

摘      要：目的建立一种用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术检测母体血浆游离DNA中父源CD41-42突变基因的排除性β-地中海贫血(简称β-地贫)的无创产前诊断方法。方法以β-actin基因为参照序列,β-地贫CD41-42突变基因为目标序列,设计特异性引物和TaqMan探针,建立基于Bio-Rad ddPCR技术的检测体系。通过对目标基因的浓度梯度样本进行检测,评估该方法的准确性、灵敏度和线性检测范围。对20例孕妇的血浆样本进行检测,对该方法进行应用评价。结果建立的ddPCR检测方法能够准确检测出母体血浆游离DNA中的β-地贫CD41-42突变基因的目标序列。目标序列浓度比例为5.00%~0.50%的相对误差均小于0.05,线性回归方程Y=1.0101X-0.0071,R^2=0.9994。20例孕妇血浆游离DNA样本的检测结果与随访确诊结果完全相符。结论建立了一种用ddPCR技术检测母体血浆游离DNA中父源β-地贫CD41-42突变的方法,其操作简单、快速、结果准确、可靠,适用于夫妇为非同型β-地贫基因携带且父方为CD41-42突变的排除性无创产前诊断。

主 题 词：数字PCR 地中海贫血 产前诊断 基因突变 

学科分类：100208[100208] 1002[医学-临床医学类] 100211[100211] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/CMA.J.ISSN.1003-9406.2018.06.002

馆 藏 号：203424035...