gfp融合的甲基对硫磷水解酶基因mph在E. coli中的表达

作     者：黄灿 程杨 马立新 严红 HUANG Can;CHENG Yang;MA Lixin;YAN Hong

作者机构：湖北大学生命科学学院湖北武汉430062 

基　　金：国家自然科学基金(31300074)资助 

出 版 物：《湖北大学学报（自然科学版）》 (Journal of Hubei University：Natural Science)

年 卷 期：2019年第41卷第1期

页      码：22-25页

摘      要：依照大肠杆菌密码子的偏爱性将来源于Pseudomonas sp. M6的有机磷水解酶基因mph设计合成了新的有机磷水解酶基因,然后将其与GFP融合进行表达,构建一株具有全细胞催化活性的大肠杆菌工程菌.设计优化后所合成的mph-r基因全长927 bp,然后将基因克隆到p ET23a-gfp大肠杆菌表达型质粒上,成功构建了重组表达质粒p ET23a-gfpmph-r,转化大肠杆菌感受态Rosetta blue.经过诱导剂IPTG的低温诱导24 h后,收集细胞,通过SDS-PAGE和Western Blot检测融合蛋白的表达.实验结果显示,融合蛋白的表达量大大提高,且通过酶活分析测定,全细胞酶活达到了11. 2 U/m L.

主 题 词：甲基对硫磷水解酶 GFP mph-r基因 融合蛋白 

学科分类：08[工学] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2375.2019.01.005

馆 藏 号：203424213...