靶向HIV-1 vif的高效siRNA的筛选及慢病毒介导的体外抗病毒研究

作     者：张涛 程通 张雅丽 魏丽华 蔡毅君 张军 朱桦 韩家淮 夏宁邵 ZHANG Tao;CHENG Tong;ZHANG Ya-li;WEI Li-hua;CAI Yi-jun;ZHANG Jun;ZHU Hua;HAN Jia-huai;XIA Ning-shao

作者机构：国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学生命科学学院福建厦门361005 

基　　金：教育部科学技术研究重大项目培育基金(705031) 福建省自然科学基金计划资助项目(2007J0111) 病毒性疾病新药研发平台(2004YZ01) 厦门市病毒性疾病新药研发平台建设(3502Z20041008) 

出 版 物：《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期：2008年第24卷第2期

页      码：88-95页

摘      要：RNAi技术在艾滋病治疗研究中已展现出巨大的潜力,兼具高效抑制特性和保守性的siRNA靶位是其获得成功应用的重要基础。本研究选择以HIV-1 vif基因为靶区筛选高效保守的RNAi序列,共选择设计了30个识别不同位点的siRNA序列,以pSUPER为载体构建了相应的shRNA表达质粒。通过与pNL4-3质粒在293FT细胞中进行共转染抑制实验,以及对初筛获得的高效序列进行保守性分析显示siRNA-vif37序列具有高效抑制效率和较好的保守性特征。通过与pGL3-vif报告质粒的共转染实验证明siRNA-vif37具有vif基因抑制特异性。带有shRNA-vif37表达元件的重组慢病毒转导后的MT-4细胞在HIV-1NL4-3体外攻毒实验中可显示出较有效的抑制病毒复制的能力,本研究进一步对转导后细胞进行克隆化筛选,获得稳定整合shRNA-vif37表达元件的MT-4-vif37细胞克隆,该细胞具有显著的抑制病毒复制的能力,在高攻毒剂量下仍可获得良好的抑制效果。本研究为进一步应用RNAi技术进行新型艾滋病治疗方法研究提供了重要基础。

主 题 词：RNA干扰 HIV-1 vif 重组慢病毒 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-8721.2008.02.002

馆 藏 号：203425026...