一步法逆转录荧光定量PCR检测食源性沙门氏菌

作     者：周晓清 李苗云 刘杰 赵改名 柳艳霞 田玮 黄现青 高晓平 

作者机构：河南省肉制品加工与质量安全控制重点实验室河南农业大学食品科学技术学院河南郑州450002 

基　　金：国家公益性行业(农业)科研专项(200903012) 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2013年第34卷第12期

页      码：182-188页

摘      要：建立采用一步法逆转录荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测食源性沙门氏菌的检测方法并初步应用。以沙门氏菌的invA基因为目的基因设计引物,优化PCR反应体系和反应条件,同时进行特异性、灵敏度和重复性实验;并用所建立的方法检测人工污染的猪肉样品,通过与传统计数方法的结果对比验证所建立方法的适用性。优化后的逆转录荧光定量PCR检测条件为:42℃、5min,95℃、10s,95℃、5s,67℃、34s;此步骤进行40个循环;上、下游引物的最佳终浓度均为0.16μmol/L。结果表明:该方法的特异性为100%;重复性良好;对沙门氏菌的检测下限为150CFU/mL;检测人工污染食品样品的结果100%符合传统计数结果。建立的检测方法具有快速、灵敏、简单等特点,非常适用于食源性沙门氏菌的检测。

主 题 词：沙门氏菌 RNA 逆转录荧光定量聚合酶链式反应 

学科分类：08[工学] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

核心收录：

D　O　I：10.7506/spkx1002-6630-201312038

馆 藏 号：203427393...