沉默HerpUD1基因表达提高人肝L-02细胞对放射处理的敏感性

作     者：张乃宁 杨彦勇 马莉 张情 宋立华 

作者机构：上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系上海200240 第二军医大学海医系防原医学教研室上海200433 第二军医大学长征医院营养科上海200025 上海交通大学陆伯勋食品安全研究中心上海200240 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30972460) 上海市自然科学基金资助项目(No.09ZR1415400)~~ 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2013年第20卷第3期

页      码：272-277页

摘      要：目的:利用RNA干扰技术沉默人肝L-02细胞内可诱导的同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1(homocysteine-inducible,endoplasmic reticulum stress-inducible,ubiquitin-like domain member 1,HerpUD1)基因表达,探讨其对人肝L-02细胞的辐射增敏作用。方法:根据HerpUD1基因序列设计shRNA片段,构建靶向HerpUD1基因的shRNA表达载体,稳定转染L-02细胞,采用real-time PCR和Western blotting检测转染后细胞中HerpUD1 mRNA及蛋白的表达。以8 Gy X射线照射转染后细胞,Hoechst荧光染色观察细胞的凋亡情况。结果:成功构建靶向HerpUD1的真核表达干扰载体,并建立稳定转染shHerpUD1的L-02细胞株。在稳定转染的L-02细胞中,shHerpUD1-1420干扰片段干扰效果最好,与pGPU6-NC组(阴性对照组)相比,shHerpUD1-1420组HerpUD1 mRNA表达显著下降[(0.15±0.05)vs(1.00±0.08),P0.05)。结论:HerpUD1基因表达沉默显著增加X射线辐射引起的L-02细胞凋亡,具有辐射增敏作用。

主 题 词：RNA干扰 HerpUD1基因 内质网膜蛋白 人肝L-02细胞 放射处理 增敏作用 

学科分类：0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 08[工学] 1010[医学-医学技术类] 100214[100214] 100106[100106] 10[医学] 

D　O　I：10.3872/j.issn.1007-385x.2013.03.003

馆 藏 号：203427394...