白背飞虱RAPD-PCR反应体系的正交设计优化

作     者：谢家楠 郭建军 金道超 XIE Jia-Nan;GUO Jian-Jun;JIN Dao-Chao

作者机构：贵州山地农业病虫害重点实验室贵州大学昆虫研究所贵阳550025 

基　　金：973计划前期研究专项(2009CB125908) 贵州省农业攻关(黔科合NY字3064号) 贵州省教育厅自然科学研究项目(2010011) 

出 版 物：《环境昆虫学报》 (Journal of Environmental Entomology)

年 卷 期：2014年第36卷第3期

页      码：348-353页

摘      要：白背飞虱Sogatella furcifera(Horváth)是水稻重要害虫之一。研究采用L16(45)正交设计优化试验,构建了白背飞虱RAPD最优反应体系,并对引物退火温度和反应循环次数进行了优化。结果表明:白背飞虱RAPDPCR最优反应体系为2μL 10×PCR Buffer(10 mmol/L Tris-HCl;50 mmol/L KCl),2.4 mmol/L Mg2+,0.15 mmol/L dNTPs,0.7μmol/L引物,0.8U Taq DNA Polymerase和30 ng模板DNA,ddH2O补充至20μL。本研究采用的10条引物的最佳退火温度在35-39℃间,以引物相应最优退火温度和40次PCR反应循环可获得较好的白背飞虱RAPD-PCR结果。

主 题 词：白背飞虱 正交设计 RAPD 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 07[理学] 09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-0858.2014.03.10

馆 藏 号：203427807...