犬瘟热病毒一步法荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：付运星 吴永丽 徐道修 崔振强 冷春青 伊鹏霏 申海清 冯娜 赵梓淇 高玉伟 夏咸柱 韦旭斌 付本懂 

作者机构：吉林大学动物医学学院吉林长春130062 军事医学科学院军事兽医研究所吉林长春130122 

基　　金：国家公益性行业(农业)科研专项项目(201403051) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2016年第36卷第3期

页      码：407-411页

摘      要：为建立犬瘟热病毒(CDV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,根据CDV核衣壳蛋白(NP)基因序列,设计合成2对通用引物和1条通用探针,通过体外转录构建绝对定量标准品RNA。对荧光定量PCR方法的各项条件进行优化,建立CDV荧光定量PCR检测方法,该方法检测灵敏度可达4.02拷贝/μL,比普通RT-PCR方法的灵敏度高出100倍,具有良好的重复性。对犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV-1)、犬冠状病毒(CCV)、犬副流感病毒(CPIV)核酸检测为阴性,具有很好的特异性。研究结果表明,建立的CDV荧光定量PCR方法具有敏感性高、特异性强、重复性好的特点,为犬瘟热的早期诊断提供了重要的技术支撑。

主 题 词：犬瘟热病毒 核衣壳蛋白基因 荧光定量PCR 标准品RNA 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2016.03.08

馆 藏 号：203428644...