双重RT-PCR体系检测美洲南瓜病毒病的研究

作     者：郭银潇 郑勇民 徐秉良 刘佳 张文军 张树武 薛应钰 沈志彦 GUO Yin-xiao;ZHENG Yong-min;XU Bing-liang;LIU Jia;ZHANG Wen-jun;ZHANG Shu-wu;XUE Ying-yu;SHEN Zhi-yan

作者机构：甘肃农业大学植物保护学院甘肃兰州730070 

基　　金：国家自然科学基金项目(31460518) 省科技厅支撑计划(1104NKCA074) 甘肃农业大学盛彤笙科技创新基金项目(GSAU-STS-1420) 

出 版 物：《甘肃农业大学学报》 (Journal of Gansu Agricultural University)

年 卷 期：2018年第53卷第6期

页      码：150-156页

摘      要：【目的】建立南瓜病毒病双重RT-PCR检测方法,检测南瓜多种病毒病.【方法】根据GenBank登录的WMV和ZYMV等病毒外壳蛋白基因序列,设计两对特异性引物,以复合感染4种病毒的南瓜病叶组织为材料,进行双重RT-PCR检测体系的优化.【结果】调查发现武威美洲南瓜病毒病种类有西瓜花叶病毒(WMV)、小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)、南瓜花叶病毒(SqMV)、烟草花叶病毒(TMV),症状类型有黄化、蕨叶、疱斑、黄化、疱斑混合症状、蕨叶、疱斑混合症状、蕨叶、疱斑、黄化混合症状.双重RT-PCR共检测到两种病毒ZYMV和WMV,双重RTPCR的最佳优化体系为:dNTPs浓度为0.3mmol/L,Taq DNA聚合酶浓度为0.5U,Mg^(2+)浓度为1.0mmol/L,最佳退火温度为50℃.双重RT-PCR检测体系验证表明从复合感染WMV和ZYMV的南瓜病叶上同时能够检测到这两种病毒,且片段大小分别为485和280bp的外壳蛋白.【结论】初步建立和优化了美洲南瓜病毒病双重RTPCR检测体系.

主 题 词：美洲南瓜 西瓜花叶病毒(WMV) 小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV) 双重RT-PCR 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

核心收录：

D　O　I：10.13432/j.cnki.jgsau.2018.06.020

馆 藏 号：203429577...