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金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A基因的克隆及其原核表达

金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A基因的克隆及其原核表达

作     者:贺宽军 郭闯 张涌 HE Kuan-jun;GUO Chuang;ZHANG Yong

作者机构:西北农林科技大学生物工程研究所陕西杨凌712100 内蒙古民族大学动物科技学院内蒙古通辽028042 

基  金:国家奶业重大科技专项基金(2002BA518A01-2) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2006年第36卷第4期

页      码:266-269页

摘      要:根据GenBank中纤连蛋白结合蛋白A基因(fnbA)序列设计了1对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增;结果获得了3 600bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pGEM T easy载体中,成功地构建了克隆质粒pGEM-fnbA。以HindⅢ和XhoⅠ双酶切pGEM-fnbA和pET28a(+),将纯化的基因fnbA亚克隆至pET28a(+)中,构建了原核表达质粒pET28a-fnbA,并将其转化至***21(DE3)感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,在约165 ku处出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带。Western-blotting分析表明,该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性。

主 题 词:金黄色葡萄球菌 fnbA 克隆 原核表达 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1673-4696.2006.04.003

馆 藏 号:203435307...

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