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壳菜果ISSR-PCR反应体系的建立与优化

壳菜果ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作     者:彭继庆 曹福祥 许若娴 Peng Jiqing;Cao Fuxiang;Xu Ruoxian

作者机构:中南林业科技大学长沙410004 

基  金:国家林业公益行业科研专项子项目"中国森林对气候变化的影响与林业适应对策研究"(200804001) 

出 版 物:《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)

年 卷 期:2012年第28卷第16期

页      码:53-59页

摘      要:为建立一个稳定、可重复的壳菜果ISSR-PCR反应体系,以壳菜果的总DNA为试验材料,通过单因素试验、正交试验和方差分析对模板DNA浓度、dNTPs浓度、镁离子浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度5个因素进行研究,确定了壳菜果ISSR-PCR反应的最优体系为:在20μL的反应体系中模板DNA为30ng,dNTPs浓度为0.20mmol/L,Mg2+浓度为2.75mmol/L,引物浓度为0.6μmol/L,TaqDNA聚合酶为2.2U。方差分析表明:5个因素中只有Mg2+浓度对反应体系影响最大,达到了显著性水平。

主 题 词:分子生物学 壳菜果 ISSR 单因素设计 正交设计 方差分析 

学科分类:0907[农学-草药学] 08[工学] 0829[工学-安全科学与工程类] 09[农学] 

D O I:10.3969/j.issn.1000-6850.2012.16.010

馆 藏 号:203435445...

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