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脱细胞角膜基质为支架构建组织工程角膜上皮组织的实验研究

脱细胞角膜基质为支架构建组织工程角膜上皮组织的实验研究

作     者:房兴峰 赵靖 史伟云 谢立信 FANG Xing-feng;ZHAO Jing;SHI Wei-yun;XIE Li-xin

作者机构:山东省眼科研究所山东省眼科学重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地青岛266071 

基  金:山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助项目(03BS018) 

出 版 物:《中华眼科杂志》 (Chinese Journal of Ophthalmology)

年 卷 期:2008年第44卷第9期

页      码:825-830页

摘      要:目的比较氯化钠(NaCl)-十二烷基硫酸钠(SDS)一胰蛋白酶与分散酶(Dispase)-聚乙二醇辛基苯基醚(Triton-X-100)两种角膜组织脱细胞方法的效果,探讨以脱细胞角膜基质为支架构建组织工程化角膜上皮组织的可行性。方法实验研究。采用完全随机化设计的方法,分别用NaCl-SDS-胰蛋白酶和Dispase—Triton—X-100处理兔角膜组织,使用裂隙灯显微镜、光学显微镜及透射电镜观察经两种方法处理后的角膜基质特性和脱细胞效果。以兔角膜缘上皮细胞为种子细胞,Dispase—Triton—X-100处理的猪角膜前弹力层与基质为支架,体外重建兔角膜上皮细胞层,并进行形态学、组织病理学及免疫组织化学检测。结果两种方法处理过的兔角膜基质大体形态相似,灰白色不透明,水肿明显,质地柔软。组织病理学和超微形态学观察显示两种方法处理的兔角膜基质胶原排列规整,NaCl-SDS-胰蛋白酶处理的角膜组织残留了部分基质细胞碎片,而Dispase—Triton—X-100处理的角膜组织未见基质细胞碎片。兔角膜缘上皮组织块接种于脱细胞猪角膜前弹力层与基质上,24h角膜上皮细胞开始游出,3~4d融合呈片状,7—8d形成单细胞层。组织工程化角膜上皮细胞表达CK3。结论Dispase—Triton—X-100处理方法的角膜组织脱细胞效果良好。以脱细胞猪角膜前弹力层与基质为支架,可在体外构建组织工程化兔角膜上皮组织。

主 题 词:角膜基质 角膜 组织工程 生物相容性材料 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0412-4081.2008.09.012

馆 藏 号:203440603...

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