总状毛霉甲壳素脱乙酰酶(CDA2)全长cDNA的克隆及原核表达

作     者：蒋霞云 袁襄南 魏福卫 周培根 邹曙明 JIANG Xia-yun;YUAN Xiang-nan;WEI Fu-wei;ZHOU Pei-gen;ZOU Shu-ming

作者机构：上海海洋大学食品学院上海201306 上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海201306 

基　　金：上海海洋大学博士启动基金项目(080219) 上海海洋大学优秀青年教师基金(080236) 

出 版 物：《上海海洋大学学报》 (Journal of Shanghai Ocean University)

年 卷 期：2011年第20卷第1期

页      码：44-49页

摘      要：采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉(Mucor racemosus)菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列。与已获得的总状毛霉菌cda1基因相比,cda2基因中不含内含子。总状毛霉cda2全长cDNA为1 378 bp,包含23 bp 5’端非翻译区、1 254 bp开放阅读框和101 bp 3’端非翻译区,编码一条由418个氨基酸残基组成的多肽链,其N端包含一段21个氨基酸残基组成的信号肽,在150～272氨基酸残基区存在一个多糖脱乙酰酶保守结构域。通过构建pET28a-cda2表达载体和进行原核表达研究,结果显示:原核表达产生的重组蛋白CDA2的分子量约为46ku,表达形式以包涵体为主,纯化获得的重组蛋白CDA2具有甲壳素脱乙酰酶催化活性。本研究为进一步研究总状毛霉CDA2的结构和功能奠定了基础。

主 题 词：甲壳素脱乙酰酶 甲壳素脱乙酰酶2基因 cDNA克隆 总状毛霉 原核表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

馆 藏 号：203441630...