猪α干扰素基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达

作     者：刘健 陈瑞爱 刘珊珊 朱杰仪 唐明森 罗满林 LIU Jian;CHEN Rui-ai;LIU Shan-shan;ZHU Jie-yi;TANG Ming-sen;LUO Man-lin

作者机构：华南农业大学兽医学院广东广州510642 广东大华农动物保健品股份有限公司广东新兴527439 莱芜市畜牧办公室动物疫病与预防控制中心山东莱芜271100 

基　　金：广东温氏食品集团有限公司2008年度第8批科研项目(C080711) 

出 版 物：《华南农业大学学报》 (Journal of South China Agricultural University)

年 卷 期：2011年第32卷第1期

页      码：93-97页

摘      要：根据毕赤酵母Pichia pastoris表达系统对于密码子的偏嗜性,将去除信号肽的猪α干扰素(PoIFN-α)基因重新设计改造并合成一段新的核苷酸序列,置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后,构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体,电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中,经Zeoc inTM抗性筛选后获得大量多拷贝重组子,SDS-PAGE和W estern-b lot分析结果表明,所获得的重组子能够分泌表达出相对分子质量约为19 000的PoIFN-α特异蛋白,其有效蛋白表达量较高达54.105 mg/L.经Vero-VSV系统测定,PoIFN-α效价达到5.87×107U/L.试验将PoIFN-α成熟肽全基因密码子进行改造,并实现了其在毕赤酵母菌表达系统中的高效分泌表达.

主 题 词：α干扰素 密码子改造 毕赤酵母 分泌表达 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-411X.2011.01.020

馆 藏 号：203441641...