猪链球菌9型荚膜多糖cps9G基因的原核表达

作     者：刘春生 徐耀辉 陈陆 杨霞 王新娟 刘春明 王川庆 

作者机构：河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 郑州牧业高等专科学校河南郑州450002 

基　　金：河南省重点科技攻关项目(072102130009) 国家科技部支撑计划(2006BAK02A21) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2011年第31卷第7期

页      码：998-1002页

摘      要：本研究旨在克隆表达猪链球菌9型荚膜多糖部分抗原表位。设计1对引物,采用PCR法以猪链球菌9型河南分离株PY-2的基因组DNA为模板扩增出cps9G全基因序列。用限制性核酸内切酶BamHⅠ、XhoⅠ进行双酶切后,将其定向克隆到pET32a(+)中,构建重组表达质粒pET32a-cps9G,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,并优化表达条件。结果表明,经1.2mmol/L IPTG诱导4h后SDS-PAGE分析表明,重组菌株表达出了约50 700的融合蛋白条带,与预期一致。Western-blotting分析表明,该融合蛋白具有特异的生物学活性。这为以后建立快速、简便、特异的免疫学检测方法及制备单克隆抗体提供了较好的抗原,同时为研制猪链球菌亚单位疫苗和诊断试剂盒奠定了基础。

主 题 词：猪链球菌 血清9型 cps9G基因 克隆 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2011.07.002

馆 藏 号：203441840...