新生隐球菌总RNA抽提方法的实验研究

作     者：徐赤宇 刘翠杰 吴建华 仇芸 赵瑾 朱红梅 温海 XU Chi-yu;LIU Cui-jie;WU Jian-hua;QIU Yun;ZHAO Jin;ZHU Hong-mei;WEN Hai

作者机构：济南军区总院皮肤科济南250031 第二军医大学附属长海医院皮肤科上海200433 第二军医大学附属长征医院皮肤科上海200003 

基　　金：第47批中国博士后科学基金(20100471802) 

出 版 物：《中国真菌学杂志》 (Chinese Journal of Mycology)

年 卷 期：2012年第7卷第3期

页      码：156-160页

摘      要：目的探讨快速获取高质量的新生隐球菌总RNA的实验方法。方法选取新生隐球菌的荚膜株、荚膜缺陷株,分别设计采用4种方法提取总RNA:酸洗玻璃珠法、液氮研磨法、异硫氰酸胍一步法、冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法。用紫外线分光光度计测量其OD260、OD280的值,并且进行琼脂糖凝胶电泳,同时应用定量PCR法鉴定RNA质量。结果酸洗玻璃珠法、液氮研磨法、异硫氰酸胍一步法、冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法的RNA产量分别为0.2μg/105细胞、0.4μg/105细胞、0.1μg/105细胞、0.6μg/105细胞。结论冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法提取的RNA均一性和完整性最好,是简便、快捷地提取具有荚膜和细胞壁双重屏障的新生隐球菌RNA的理想方法。

主 题 词：新生隐球菌 RNA 真菌 液氮 Yeast RNA kit 酸洗玻璃珠法 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-3827.2012.03.008

馆 藏 号：203442443...