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人重组pMAGE-A1/EGFP真核表达质粒的构建与表达

人重组pMAGE-A1/EGFP真核表达质粒的构建与表达

作     者:于津浦 张斌 任秀宝 YU Jin-pu;ZHANG Bin;REN Xiu-bao

作者机构:天津医科大学附属肿瘤医院免疫室天津300060 天津医科大学附属肿瘤医院乳腺科天津300060 

出 版 物:《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期:2005年第21卷第2期

页      码:107-110页

摘      要:目的 特异克隆MAGE A1开放读码框基因,构建以绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的包含MAGE A1的真核表达载体并转染人PBMC来源DC细胞。方法 根据MAGE A1特征序列设计PCR扩增引物,从Mel 5 2 6中扩增MAGE A1基因开放读码框,并克隆至pIRES EGFP中,构建人重组pMAGE A1 EGFP真核表达质粒。利用电转染方法将该重组质粒转入人外周血来源DC细胞并检测MAGE A1和EGFP的表达情况。结果 成功构建真核表达质粒pMAGE A1 EGFP ,转染人PBMC来源DC细胞并检测到MAGE A1和EGFP表达,两者表达率分别为(8.8±0 .9) %和(8.4 7±0 .78) % ,无统计学差异。结论 成功构建人重组真核表达质粒pMAGE A1 EGFP ,为开展MAGE A1为基础的免疫治疗提供有利的分子生物学工具。

主 题 词:MAGE-A1基因 绿色荧光蛋白 基因克隆 真核表达质粒 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1000-8861.2005.02.008

馆 藏 号:203449268...

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