RI基因siRNA干扰质粒的构建及其对人膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响

作     者：欧阳溪 陈俊霞 何晓燕 褚颖豪 夏俊 OUYANG Xi, CHEN Jun-xia, HE Xiao-yan, et al(Cell Biology and Genetics Division, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China)

作者机构：重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 

基　　金：重庆市科委自然科学基金面上项目(CSTC 2006BB5287) 重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJ060313) 重庆医科大学启动基金(0200100412) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2009年第22卷第5期

页      码：431-437页

摘      要：目的构建核糖核酸酶抑制因子(RI)基因siRNA干扰质粒,并检测其对人膀胱癌细胞BIU-87迁移和侵袭能力的影响。方法设计并构建针对RI基因mRNA的2个特异性siRNA表达载体和1个无同源性的阴性对照载体,经酶切和DNA测序鉴定后,转染BIU-87细胞,通过RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学法检测干扰的有效性。光镜及HE染色观察细胞形态的改变,黏附试验、划痕试验和Transwell法检测细胞黏附、迁移和侵袭能力的变化,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架微丝结构。结果酶切和测序结果证明干扰质粒构建正确;转染特异性siRNA表达载体的BIU-87细胞RI蛋白的表达水平明显降低,对照组未发生明显改变;转染干扰质粒的细胞堆叠严重,细胞黏附能力显著降低,迁移和侵袭能力显著提高,细胞骨架微丝聚集,伸展出片状伪足。结论已成功构建RI基因siRNA干扰质粒,其可显著提高膀胱癌细胞的迁移和侵袭能力,说明RI可作为抑制肿瘤迁移和侵袭的有效靶点。

主 题 词：核糖核酸酶抑制因子 RNA干扰 膀胱癌细胞 迁移 侵袭 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13200/j.cjb.2009.05.12.ouyx.023

馆 藏 号：203449765...