基于CRISPR/Cas9构建基因编辑小鼠sgRNA有效性验证研究

作     者：许文豪 周婉 臧敦安 巩雪洁 刘庆华 于孟飞 薛璐 彭勇波 XU Wen-hao;ZHOU Wan;ZANG Dun-an;GONG Xue-jie;LIU Qing-hua;YU Meng-fei;XUE Lu;PENG Yong-bo

作者机构：中南民族大学生命科学学院武汉430074 

基　　金：国家自然科学基金项目(31371307) 中南民族大学中央高校基本科研业务费专项(CZP17082) 

出 版 物：《湖北农业科学》 (Hubei Agricultural Sciences)

年 卷 期：2018年第57卷第24期

页      码：156-159页

摘      要：以小鼠S100A9基因为例,设计针对该基因的sgRNA,体外转录后与Cas9 mRNA通过显微注射入受精卵,选取囊胚期的胚胎,单枚独立进行基因型分析,并综合得出编辑效率。结果表明,显微注射113枚受精卵,其中28枚成功发育到囊胚期,其中有5枚囊胚在特定位点产生了基因突变,总编辑效率为18%。该方法操作简单,可快速对sgRNA活性进行体内验证,并为后续基因编辑小鼠的制备提供基础。

主 题 词：CRISPR/Cas9 小鼠 sgRNA有效性 囊胚 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.24.042

馆 藏 号：203453534...