逆转录环介导等温扩增技术检测H7N9禽流感病毒基因

作     者：张锦海 陈文琦 韩一芳 张琪 叶福强 王太武 陈乐如 王长军 ZHANG Jin-hai;CHEN Wen-qi;HAN Yi-fang;ZHANG Qi;YE Fu-qiang;WANG Tai-wu;CHEN Le-ru;WANG Chang-jun

作者机构：东部战区疾病预防控制中心疾病预防控制所南京210002 南京医科大学附属南京第一医院皮肤科南京210006 

基　　金：军队后勤重大项目(AWS16J020) 

出 版 物：《东南国防医药》 (Military Medical Journal of Southeast China)

年 卷 期：2019年第21卷第1期

页      码：7-11页

摘      要：目的建立检测H7N9禽流感病毒基因的逆转录环介导等温扩增(reverse transcription Loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法,并初步评估应用。方法设计、合成H7N9禽流感病毒血凝素(HA)基因、神经氨酸酶(NA)基因的引物组,通过优化参数,建立RT-LAMP反应体系,使用梯度稀释的标准品测试该体系检测灵敏度,并使用对比毒株测试特异性,再对142份临床标本进行实样检测。结果成功建立了检测H7N9禽流感病毒HA基因、NA基因的RT-LAMP方法,可直接肉眼观察判读结果,检测其HA基因、NA基因的敏感性分别达到10拷贝每反应、5拷贝每反应,对其他常见呼吸道病原无交叉反应;在测序证实阳性的临床样本中,对于病毒HA基因、NA基因检出率分别为100%、92.68%。结论逆转录环介导等温扩增技术检测H7N9禽流感病毒基因,具有简单、快速、灵敏度高,检测结果可视化,无需特殊设备等优点,在禽流感病原监测上有一定应用前景。

主 题 词：H7N9禽流感病毒 逆转录环介导等温扩增 检测 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-271X.2019.01.002

馆 藏 号：203453813...