南海芋螺ITS-PCR体系的建立与优化

作     者：陈琴 彭超 赵峰 李军 高炳淼 CHEN Qin;PENG Chao;ZHAO Feng;LI Jun;GAO Bingmiao

作者机构：海南广播电视大学海南海口570208 深圳华大海洋科技有限公司广东深圳518083 海南医学院药学院海南海口571199 

基　　金：海南省自然科学基金项目(317170) 

出 版 物：《贵州农业科学》 (Guizhou Agricultural Sciences)

年 卷 期：2018年第46卷第12期

页      码：25-28页

摘      要：为了建立适合南海芋螺的ITS-PCR体系以研究不同种类芋螺的遗传多样性,以多种芋螺的3种不同组织为材料,利用海洋生物基因组试剂盒法提取芋螺基因组DNA为模板,采用正交试验对ITS-PCR过程中的关键影响因素进行优化,以最优ITS-PCR体系扩增获得不同种类芋螺的ITS序列并进行测序鉴定。结果表明:最佳ITS-PCR反应体系(25μL)为Taq酶0.3U,dNTPs 3mmol/L,Mg^(2+)1.0mmol/L,引物2.0μmol/L,模板40ng,10×PCR Buffer(不含Mg^(2+))2.5μL,ddH_2O补足25μL。采用该最佳体系对芋螺基因组DNA进行PCR扩增,产物经单向测序获得芋螺ITS部分序列,经NCBI数据库比对其匹配度为83%。

主 题 词：芋螺 ITS-PCR 体系优化 正交设计 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-3601.2018.12.006

馆 藏 号：203454139...