利用环介导等温扩增方法快速检测瓜类细菌性果斑病菌和番茄细菌性溃疡病菌

作     者：吴秀芹 杨樱子 罗金燕 邱文 安千里 李斌 Wu Xiuqin;Yang Yingzi;Luo Jinyan;Qiu Wen;An Qianli;Li Bin

作者机构：浙江大学生物技术研究所农业部作物病虫分子生物学重点实验室杭州310058 上海市农业技术推广服务中心上海201103 

基　　金：上海市农业基础性研究项目(沪农科攻字(2014)第7-3-1号,沪农科攻字(2015)第4-4号) 浙江省科技厅项目(2017C02002) 

出 版 物：《植物保护学报》 (Journal of Plant Protection)

年 卷 期：2018年第45卷第6期

页      码：1235-1241页

摘      要：为建立简单、快速和灵敏地检测瓜类细菌性果斑病菌Acidovorax avenae subsp. citrulli(Aac)和番茄细菌性溃疡病菌Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis(Cmm)的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,以Aac的ugpB基因和Cmm的micA基因为靶标,分别设计、合成和筛选特异性引物,摸索和优化各项反应条件和反应体系,成功建立了以钙黄绿素颜色为指示且只需要金属浴恒温反应30～60 min的LAMP扩增体系。特异性分析表明该LAMP方法可以快速检出5株不同的Aac菌株和2株不同的Cmm菌株,其它对照菌株如燕麦嗜酸菌燕麦亚种A. avenae subsp. avenae、丁香假单胞菌Pseudomonas syringae、水稻黄单胞菌水稻致病变种Xanthomonas oryzae pv. oryzae和茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum则呈现阴性反应;引物比目前报道的LAMP引物有更高的DNA样品检测灵敏度,Aac和Cmm的灵敏度分别为1.72×10~2fg/μL和1.26×10~2fg/μL。研究结果表明,所设计的Aac和Cmm引物特异性好、灵敏度高,更有利于从源头上控制这2种检疫性细菌病害的流行和传播。

主 题 词：瓜类细菌性果斑病菌 番茄细菌性溃疡病菌 环介导等温扩增方法 快速检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 090402[090402] 

核心收录：

D　O　I：10.13802/J.CNKI.ZWBHXB.2018.2017106

馆 藏 号：203454525...