用pfcrt点突变基因检测技术检测恶性疟原虫氯喹抗药性的初步研究

作     者：王安平 高琪 顾亚萍 周华云 王善青 王光泽 林世干 蒙锋 Wang Anping;Gao Qi;Gu Yaping;Zhou Huayun;Wang Shanqing;Wang Guangze;Lin Shigan;Meng Feng

作者机构：江苏省寄生虫病防治研究所江苏省寄生虫分子生物学重点实验室 海南省疾病预防控制中心 

出 版 物：《中国血吸虫病防治杂志》 (Chinese Journal of Schistosomiasis Control)

年 卷 期：2005年第17卷第2期

页      码：120-123页

摘      要：目的　建立一种恶性疟原虫氯喹抗药性基因pfcrt点突变的检测方法,以判断是否存在氯喹抗药性。方法　根据恶性疟原虫pfcrt基因序列设计巢式PCR引物,以恶性疟原虫DNA为模板扩增出一条包含第76位密码子的DNA片段;扩增产物经限制性内切酶Apo I消化,用琼脂糖凝胶电泳观察恶性疟原虫pfcrt等位基因是否为突变型。结果　31份样本经巢式PCR扩增均出现14 0 bp左右的特异性片段。酶切消化后,9份滤纸血样本中有4例出现1条14 0 bp左右的片段,为突变型pfcrt等位基因,其余5份出现97bp与4 8bp两种酶切片段,为野生型pfcrt等位基因;2 2份血涂片样本中有10份突变型,突变率为4 5 .16 %。14例突变样本中,有1例体内实验氯喹治疗有效。结论　巢式PCR- RFL P法可以快速、高效的检测恶性疟原虫pfcrt基因76位密码子的点突变,并且能够初步应用于恶性疟原虫氯喹抗药性的鉴别。

主 题 词：恶性疟原虫 氯喹抗药性 pfcrt基因 巢式PCR 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-6661.2005.02.010

馆 藏 号：203454898...