西尼罗I型病毒亚克隆的构建及其鉴定

作     者：商涛 马文丽 黄吉城 张海燕 廖之君 陈霞 郑文岭 SHANG Tao;MA Wen-li;HUANG Ji-cheng;ZHANG Hai-yan;LIAO Zhi-jun;CHEN Xia;ZHENG Wen-ling

作者机构：南方医科大学基因工程研究所广州510515 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心广州510623 

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科技计划资助项目(No.2006IK168) 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2008年第8卷第3期

页      码：205-208页

摘      要：目的构建西尼罗病毒基因组的cDNA亚克隆,为西尼罗病毒全长cDNA克隆的研发和应用打下基础。方法根据基因组中限制性酶切位点的分布设计4对引物,QIAamp RNA抽提试剂盒提取西尼罗病毒培养细胞BHK-21的总RNA,长片段RT-PCR技术扩增目的基因片段。将目的基因片段与pMD18-T载体进行连接,转化入感受态细胞*** DH5α,进行蓝白斑筛选后得到阳性克隆,将重组质粒进行PCR和测序鉴定。结果获得的目的基因片段经PCR和测序结果表明西尼罗病毒功能基因正确地克隆进入载体。结论成功获得西尼罗I型病毒功能基因的cDNA亚克隆,可应用于西尼罗病毒全长cDNA克隆的制备。

主 题 词：克隆载体 亚克隆构建 长片段RT-PCR 西尼罗病毒 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-3619.2008.03.005

馆 藏 号：203455790...