环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR方法的建立及应用

作     者：王素华 袁淑辉 吴绍强 吕继洲 帅江冰 张晓峰 赵治国 WANG Su-hua;YUAN Shu-hui;WU Shao-qiang;LYU Ji-zhou;SHUAI Jiang-bing;ZHANG Xiao-feng;ZHAO Zhi-guo

作者机构：温州海关浙江温州325027 中国检验检疫科学研究院动物检疫所北京100029 杭州海关浙江杭州310016 呼和浩特海关内蒙古呼和浩特010020 

基　　金：国家质检总局科技计划项目(2016IK277) 浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02044) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2019年第41卷第1期

页      码：53-57页

摘      要：为建立一种快速、敏感检测牛环形泰勒虫的方法,本研究根据GenBank中登录的牛环形泰勒虫Tams1基因序列,设计合成1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测牛环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。研究结果显示,该方法可以特异地检测牛环形泰勒虫,而对牛巴贝斯虫、反刍动物艾立希体和弓形虫检测均为阴性;该方法的灵敏度可达到180拷贝/μL,比常规PCR敏感10倍;组内和组间变异系数均小于1.0%。对15份临床血液样品和20只璃眼蜱进行检测,SYBR Green I荧光定量PCR和常规PCR的阳性检出率分别为42.86%和28.57%。本研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法具有特异性强、敏感性高的特点,可准确、高效检测牛环形泰勒虫,为牛环形泰勒虫病防控提供技术支持。

主 题 词：牛环形泰勒虫 Tams1基因 SYBR Green I荧光定量PCR 建立及应用 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.201805030

馆 藏 号：203458048...