沙门氏菌LAMP可视化检测方法的建立

作     者：高志强 汪琳 张灿 任彤 赵相鹏 尹羿 蒲静 史雅然 刘凤华 Gao Zhiqiang;Wang Lin;Zhang Can;Ren Tong;Zhao Xiangpeng;Yin Yi;Pu Jing;Shi Yaran;Liu Fenghua

作者机构：北京检验检疫技术中心北京100026 中国人民解放军疾病预防控制所北京100071 北京农学院北京102206 

基　　金：国家重点研发计划项目(2017YFF0210305) 北京市科技计划课题(Z171100001317011) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2019年第36卷第2期

页      码：68-72页

摘      要：为实现沙门氏菌的快速现场检测,根据沙门氏菌invA基因编码区序列,设计合成1套引物,通过对反应物浓度和反应条件优化,建立了沙门氏菌属特异性LAMP检测方法;通过对invA基因8个区域的6条引物配对进行等温扩增,并在反应体系中加入HNB来指示反应结果,实现了反应的快速闭管检测。灵敏度试验显示,建立的方法可以检出稀释至3.6×10~1 CFU/mL菌液所提取的DNA;特异性试验显示,建立的方法与大肠杆菌DNA、志贺氏菌DNA、布鲁氏菌试管凝集抗原DNA、炭疽沉淀抗原DNA以及猪链球菌2型DNA不发生交叉反应,但能检出鸡白痢、禽伤寒沙门氏菌凝集抗原以及马流产试管凝集抗原提取的DNA;重复性试验显示,3个稀释度菌液DNA的3次重复检测均为阳性;应用试验显示,从经增菌培养的200份进境猴粪拭子样品中检出阳性2份,与细菌分离鉴定检测结果一致。结果表明,所建立的方法敏感性和特异性较高,重复性满足实际要求,可用于进境动物样品的沙门氏菌检测。

主 题 词：沙门氏菌 LAMP 可视化检测 检疫 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2019.02.018

馆 藏 号：203458282...