猪链球菌微滴数字PCR定量检测方法的建立

作     者：石磊 温雯 陈洵 叶蕾 常彦磊 李丽丽 SHI Lei;WEN Wen;CHEN Xun;YE Lei;CHANG Yan-lei;LI Li-li

作者机构：暨南大学食品安全与营养研究院广东广州510632 

基　　金：国家重点研发计划项目(2016YFD0500600) 广东省科技计划项目(2017B020207004) 中央高校基本科研业务费项目(2017MS104 21618309) 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2019年第35卷第1期

页      码：233-238页

摘      要：根据猪链球菌(Streptococcus suis,SS)gdh基因的保守序列设计特异性引物和Taq Man探针,通过反应条件优化和特异性、敏感性、重复性试验以及临床样品的检测,建立可对其准确定量的微滴数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)检测方法,并与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法进行比较分析。结果表明,该方法特异性良好,与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪圆环病毒2型和伪狂犬病毒无交叉反应;灵敏度优于qPCR,线性相关系数(R2)为0.991,呈良好线性关系,最低可检测到2.692 copies/μL的阳性质粒;稳定性好,变异系数为1.66%。临床样品定量检测结果表明,dd PCR具有敏感性高、特异性好等优点,能对qPCR检测的可疑样品进行精确定量。本研究建立的dd PCR能够准确定量检测SS,将为SS相关研究提供有益参考。

主 题 词：猪链球菌 微滴数字PCR 检测方法 

学科分类：0832[0832] 090601[090601] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.1.033

馆 藏 号：203458411...