蜱传反刍动物艾立希体巢式PCR检测方法的建立及应用

作     者：王素华 袁淑辉 吴绍强 吕继洲 帅江冰 张晓峰 赵治国 WANG Su-hua;YUAN Shu-hui;WU Shao-qiang;LYU Ji-zhou;SHUAI Jiang-bing;ZHANG Xiao-feng;ZHAO Zhi-guo

作者机构：温州海关浙江温州325027 中国检验检疫科学研究院动物检疫所北京100029 杭州海关浙江杭州310016 呼和浩特海关内蒙古呼和浩特010020 

基　　金：浙江省公益技术应用农村农业资助项目(LGN19C180001) 浙江省重大科技专项重点农业资助项目(2015C02044) 国家质检总局科技计划资助项目(2016IK277) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2019年第39卷第2期

页      码：271-275页

摘      要：为建立一种快速、敏感检测反刍动物艾立希体的方法,本研究根据GenBank中登录的反刍动物艾立希体pCS20基因保守区设计2对特异性引物,经各反应条件的优化,建立了反刍动物艾立希体巢式PCR检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测反刍动物艾立希体DNA,而对牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、牛环形泰勒虫和弓形虫的检测均为阴性,具有良好的特异性;该方法灵敏度可达1.04×101拷贝/μL,是反刍动物艾立希体实时荧光PCR检测试剂盒的10倍,是常规PCR的1 000倍。对50只血蜱、花蜱和微小牛蜱DNA进行检测,巢式PCR、反刍动物艾立希体实时荧光PCR检测试剂盒和常规PCR的阳性检出率分别为26.0%,14.0%和0.0%。本试验建立的巢式PCR检测方法适用于反刍动物艾立希体病的早期诊断和分子流行病学调查,为蜱传反刍动物艾立希体病的防控提供技术支持。

主 题 词：反刍动物艾立希体 pCS20基因 巢式PCR 蜱传 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.02.14

馆 藏 号：203458876...