肺炎支原体黏附蛋白P30的高效表达及初步应用

作     者：王成红 于传亭 张奇舒 李鹏飞 王晓丹 修冰水 张贺秋 WANG Cheng-Hong;YU Chuan-Ting;ZHANG Qi-Shu;LI Peng-Fei;WANG Xiao-Dan;XIU Bing-Shui;ZHANG He-Qiu

作者机构：烟台市烟台山医院检验科山东烟台264000 军事医学科学院基础医学研究所北京100850 

基　　金：国家重大科技专项(2013ZX10004803) 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2014年第25卷第6期

页      码：821-823页

摘      要：目的:克隆表达肺炎支原体黏附蛋白P30,为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础。方法:采用大肠杆菌优势密码子设计P30蛋白优化基因序列,采用Genscript软件评价设计基因的密码子适应指数(CAI),并利用载体p BVIL1实现P30优势表位基因在大肠杆菌中的表达,采用ELISA法对纯化的P30抗原活性进行测定。结果:野生P30基因的CAI为0.59,优化P30基因的CAI为0.84;在大肠杆菌中表达的IL1-P30融合蛋白的相对分子质量为43.5×103,纯化后的重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性免疫反应,灵敏度和特异性分别为82.35%和89.36%,ROC曲线下面积为0.9088。结论:采用密码子优化技术实现了肺炎支原体黏附蛋白P30在大肠杆菌中的高效表达,获得的重组P30蛋白具有很好的抗原性,可用于肺炎支原体诊断试剂的研究。

主 题 词：肺炎支原体 P30黏附蛋白 优势密码子 原核表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2014.06.016

馆 藏 号：203458947...