CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑

作     者：邹修平 范迪 彭爱红 何永睿 许兰珍 雷天刚 姚利晓 李强 罗克明 陈善春 ZOU Xiuping;FAN Di;PENG Aihong;HE Yongrui;XU Lanzhen;LEI Tiangang;YAO Lixiao;LI Qiang;LUO Keming;CHEN Shanchun

作者机构：西南大学柑桔研究所重庆400712 西南大学生命科学学院重庆400715 

基　　金：南方山地园艺学教育部重点实验室开放课题项目 国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-26) 重庆市自然科学基金项目(cstc2017jcyjBX0020) 

出 版 物：《园艺学报》 (Acta Horticulturae Sinica)

年 卷 期：2019年第46卷第2期

页      码：337-344页

摘      要：为了获得CsLOB1启动子较大片段删除的突变体,利用CRISPR/Cas9技术对CsLOB1启动子进行多位点编辑。通过在CsLOB1启动子的EBEPthA4区域及其上、下游设计不同的靶标位点,构建了2个植物表达载体pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites,分别对CsLOB1启动子同时进行2个位点和3个位点的编辑。测序结果表明pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites的基因编辑效率分别为64.7%和80.0%,突变体植株在2个sgRNA之间发生了DNA片段的删除。进一步的分析发现,不同的sgRNA具有不同的突变效率,其差异是由于不同的sgRNA对CsLOB1-识别和结合能力的差异造成的。本结果表明对CsLOB1启动子进行多位点编辑可以获得删除较大DNA片段的突变体。

主 题 词：柑橘 CRISPR/Cas9系统 CsLOB1 多位点 基因编辑 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

核心收录：

D　O　I：10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0383

馆 藏 号：203459785...